Системы биологической ремедиации должны включать биологические спосо-бы как окисления и деструкции органических поллютантов в почве, так и стабили-зации или удаления тяжелых металлов.
Сейчас внедряются в практику защиты окружающей среды технологии очист-ки почв с применением нефтеокисляющих биопрепаратов, технологий фитореме-диации способных извлекать тяжелые металлы из почвы с помощью растений-гипераккумуляторов.
Полиароматические углеводороды плохо поддаются микробной деструкции и накапливаются в почве, адсорбируясь на почвенных частицах. Поэтому важным является поиск активных микробных деструкторов ПАУ, создание на их основе эффективных биопрепаратов, которые могут являться составной частью систем биологической ремедиации загрязненных почв.
Из почв и водоемов полигона токсичных отходов Санкт-Петербурга выделены 5 микробных ассоциаций активно окисляющих фенантрен. Проведена идентифика-ция входящих в ассоциации культур микроорганизмов и исследована их ПАУ-деструктивная активность в лабораторных почвенных экспериментах, выбраны наи-более активные ассоциации. Проведены исследования показывающие эффектив-ность использования биопрепаратов нефтедеструкторов и ПАУ-деструкторов для очистки почв городских территорий с высоким содержанием органического загряз-нения. В предварительных лабораторных исследованиях было установлено, что бак-терии, входящие в состав биопрепарата БАК не проявляют антагонистических свойств по отношению к микроорганизмам в составе ассоциации III.
В лабораторном опыте с почвой загрязненном ПАУ, использовали наиболее актив-ную ассоциацию микроорганизмов-деструкторов ПАУ III. Посевной материал перед ин-тродукцией в почву выращивали в жидкой среде Чапека с глюкозой (г/л: NaNO3 - 2.0; K2HPO4 . 3Н2О - 1.0; MgSO4 . 7 Н2О - 0.5; KCl - 0.5; FeSO4 . 7Н2О - 0.01, глюкоза - 20, во-да дистиллированная до 1 л, pH после стерилизации 6,5 -7) [Практикум по микробиоло-гии: учеб. пособие для студ. высш. учеб. заведений / А.И.Нетрусов, М.А.Егорова, Л.М. Захарчук и др.; Под ред. А.И.Нетрусова. - М.: Академия, 2005.-608 с.], в течение 4 суток при 250С на качалке.
В состав ассоциации предположительно входят микроорганизмы родов: Pseudomo-nas, Cellulomonas, Aeromonas, Alcaligenes. Идентификацию микроорганизмов проводили по физиолого-морфологическим и биохимическим признакам по определителю Берджи [Определитель бактерий Берджи. В 2-х т. Т.1: Пер. с англ./Под ред. Дж.Хоулта, Н.Крига, П.Снита и др. - М.:Мир, 1997. - 432 с.].
Известно, что бактерии, иммобилизованные на носителе, более устойчивы к дейст-вию токсикантов, характеризуются повышенной метаболической активностью [Могиле-вич Н.Ф. // Микробиол. Журнал. - 1995. - Т. 57. - №5. - С. 90-105.]. Поэтому перед вне-сением в почву клетки ассоциации микроорганизмов закрепляли на носителе-торфе.
Воздушно сухую загрязненную почву просеивали через сито с диаметром от-верстий 3 мм, помещали в сосуды, увлажняли до 60 % от полной влагоемкости и вносили препарат, в соответствии с вариантами опыта.
Влажность почвы поддерживали на протяжении всего опыта на первоначаль-ном уровне и проводили систематическое рыхление для улучшения аэрации. Инку-бация продолжалась в течение 60 сут.
Определение нефтяных углеводородов, в том числе ПАУ, проводилось хрома-томасс-спектрометрическим методом. Для выделения органических веществ из проб почвы применяли троекратную экстракцию хлористым метиленом в ультразвуковой установке в соотношении 10 г сухой пробы: 75 мл растворителя. Хроматографиро-вание экстрактов производили на хроматомасс-спектрометре QP-2010 фирмы Shi-madzu.